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電子顯微鏡原理

導(dǎo)讀:電子顯微鏡是20世紀(jì)的重大科學(xué)技術(shù)發(fā)明,如同三極管的發(fā)明推動革命了半導(dǎo)體界一樣,電子顯微鏡也極大地促進(jìn)了生命科學(xué)的發(fā)展,發(fā)明掃描隧道電子顯微鏡的兩位科學(xué)家還獲得了諾貝爾獎。本文詳細(xì)介紹電子顯微鏡功能、結(jié)構(gòu)和原理,感興趣的同學(xué)請多多關(guān)注。。。

1. 電子顯微鏡原理—簡介

電子顯微鏡(electron microscopy)是根據(jù)電子光學(xué)原理,用電子束和電子透鏡代替光束

和光學(xué)透鏡,使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像的儀器。 近年來,電鏡的研究和制造有了很大的發(fā)展:一方面,電鏡的分辨率不斷提高,透射電鏡的點(diǎn)分辨率達(dá)到了0.2-0.3nm,晶格分辨率已經(jīng)達(dá)到0.1nm左右,通過電鏡,人們已經(jīng)能直接觀察到原子像;另一方面,除透射電鏡外,還發(fā)展了多種電鏡,如掃描電鏡、分析電鏡等。

電子顯微鏡的分辨本領(lǐng)雖已遠(yuǎn)勝于光學(xué)顯微鏡,但電子顯微鏡因需在真空條件下工作,所以很難觀察活的生物,而且電子束的照射也會使生物樣品受到輻照損傷。

2. 電子顯微鏡原理—結(jié)構(gòu)

電子顯微鏡由電子光學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)和供電系統(tǒng)三部分組成,下面分別介紹三部分:

1) 電子光學(xué)系統(tǒng)

電子光學(xué)系統(tǒng)主要有電子槍、電子透鏡、樣品架、熒光屏和照相機(jī)構(gòu)等部件,這些部件通常是自上而下地裝配成一個柱體。

電子槍是由鎢絲熱陰極、柵極和陰極構(gòu)成的部件。它能發(fā)射并形成速度均勻的電子束,所以加速電壓的穩(wěn)定度要求不低于萬分之一。

電子透鏡是電子顯微鏡鏡筒中最重要的部件,它用一個對稱于鏡筒軸線的空間電場或磁場使電子軌跡向軸線彎曲形成聚焦,其作用與玻璃凸透鏡使光束聚焦的作用相似,所以稱為電子透鏡?,F(xiàn)代電子顯微鏡大多采用電磁透鏡,由很穩(wěn)定的直流勵磁電流通過帶極靴的線圈產(chǎn)生的強(qiáng)磁場使電子聚焦。

2) 真空系統(tǒng)

為了保證真在整個通道中只與試樣發(fā)生相互作用,而不與空氣分子發(fā)生碰撞,因此,整個電子通道從電子槍至照相底板盒都必須置于真空系統(tǒng)之內(nèi),一般真空度為10-4~10-7毫米汞柱。

3) 供電系統(tǒng)

透射電鏡需要兩部分電源:一是供給電子槍的高壓部分,二是供給電磁透鏡的低壓穩(wěn)流部分。電源的穩(wěn)定性是電鏡性能好壞的一個極為重要的標(biāo)志。所以,對供電系統(tǒng)的主要要求是產(chǎn)生高穩(wěn)定的加速電壓和各透鏡的激磁電流。近代儀器除了上述電源部分外,尚有自動操作程序控制系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理的計算機(jī)系統(tǒng)。

3. 電子顯微鏡原理—工作原理

目前,電子顯微鏡技術(shù)(electron microscopy)已成為研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)的重要手段。常用的有透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)和掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM)。下面分別介紹兩種電子顯微鏡的工作原理:

1) 透射電子顯微鏡(Transmission electron microscope,TEM)

透射電鏡即透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,簡稱TEM),通常稱作電子顯微鏡或電鏡(EM),是使用最為廣泛的一類電鏡。

工作原理:在真空條件下,電子束經(jīng)高壓加速后,穿透樣品時形成散射電子和透射電子,它們在電磁透鏡的作用下在熒光屏上成像。電子束投射到樣品時,可隨組織構(gòu)成成分的密度不同而發(fā)生相應(yīng)的電子發(fā)射,如電子束投射到質(zhì)量大的結(jié)構(gòu)時,電子被散射的多,因此投射到熒光屏上的電子少而呈暗像,電子照片上則呈黑色。

主要優(yōu)點(diǎn):分辨率高,可用來觀察組織和細(xì)胞內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)以及微生物和生物大分子的全貌。

2) 掃描電鏡(Scanning Electron microscope)

掃描電鏡即掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscope,簡稱SEM)。主要用于觀察樣品的表面形貌、割裂面結(jié)構(gòu)、管腔內(nèi)表面的結(jié)構(gòu)等。

工作原理:掃描電鏡是利用二次電子信號成像來觀察樣品的表面形態(tài)。用極細(xì)的電子束在樣品表面掃描,激發(fā)樣品表面放出二次電子,將產(chǎn)生的二次電子用特制的探測器收集,形成電信號運(yùn)送到顯像管,在熒光屏上顯示物體。(細(xì)胞、組織)表面的立體構(gòu)像,可攝制成照片。

主要優(yōu)點(diǎn):景深長,所獲得的圖像立體感強(qiáng),可用來觀察生物樣品的各種形貌特征。

通過上面的介紹,相信大家已經(jīng)對電子顯微鏡結(jié)構(gòu)和原理有了比較清晰的了解,小編還精心選取了四篇關(guān)于電子顯微鏡的文章,希望大家多多學(xué)習(xí)。。。

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